WO2025094167 - PROTEASE ENZYME PRODUCTION PROCESS USING MOLASSES-UREA MEDIA ENRICHED WITH YEAST EXTRACT

National phase entry is expected:
Publication Number WO/2025/094167
Publication Date 08.05.2025
International Application No. PCT/ID2023/000012
International Filing Date 01.12.2023
Title [English] PROTEASE ENZYME PRODUCTION PROCESS USING MOLASSES-UREA MEDIA ENRICHED WITH YEAST EXTRACT [French] PROCÉDÉ DE PRODUCTION D'ENZYME PROTÉASE UTILISANT UN MILIEU MÉLASSE-URÉE ENRICHI EN EXTRAIT DE LEVURE
Applicants ** BADAN RISET DAN INOVASI NASIONAL (BRIN) Gedung B.J. Habibie, Jl. M.H. Thamrin no.8, Kebon Sirih, Menteng Jakarta Pusat, 10340, ID
Inventors ** SUHENDAR, Dadang Pusat Riset Mikrobiologi Terapan - BRIN Jl. Raya Jakarta-Bogor KM. 46, Cibinong Bogor, Jawa Barat 16911, ID WALTAM, Deden Rosid Pusat Riset Mikrobiologi Terapan - BRIN Jl. Raya Jakarta-Bogor KM. 46, Cibinong Bogor, Jawa Barat 16911, ID WIDYASTI, Erma Pusat Riset Mikrobiologi Terapan - BRIN Jl. Raya Jakarta-Bogor KM. 46, Cibinong Bogor, Jawa Barat 16911, ID NURHAYATI, Niknik Pusat Riset Mikrobiologi Terapan - BRIN Jl. Raya Jakarta-Bogor KM. 46, Cibinong Bogor, Jawa Barat 16911, ID WAHJONO, Edi Pusat Riset Mikrobiologi Terapan - BRIN Jl. Raya Jakarta-Bogor KM. 46, Cibinong Bogor, Jawa Barat 16911, ID NANDYAWATI, Dewi Pusat Riset Agroindustri - BRIN Jl. Raya Jakarta-Bogor KM. 46, Cibinong Bogor, Jawa Barat 16911, ID SANTOSO, Eko Pusat Riset Teknologi Industri Proses dan Manufaktur - BRIN Gedung 720, Kawasan Sains dan Teknologi B.J. Habibie, Setu, Tangerang Selatan, Banten 15314, ID MUFTI, Ayi Pusat Riset Agroindustri - BRIN Jl. Raya Jakarta-Bogor KM. 46, Cibinong Bogor, Jawa Barat 16911, ID SUPRIADI Direktorat Pengelolaan Laboratorium, Fasilitas Riset, dan Kawasan Sains dan Teknologi - BRIN Gedung B.J. Habibie, Jl. M.H. Thamrin no.8, Kebon Sirih, Menteng Jakarta Pusat, 10340, ID
Priority Data P00202311516  31.10.2023  ID
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Quotation for National Phase entry

Country Stages Total
China Filing 925
EPO Filing, Examination 6536
Japan Filing 575
South Korea Filing 579
USA Filing, Examination 2635
MasterCard Visa
Total: 11250
Abstract [English] DSM 319 bacterial strain by making a preculture, a 100ml culture, a 1L culture in a shaker flask using liquid LB media incubated in an incubator shaker for 3-4 hours at 35-40°C with an agitation speed of 150 rpm, until an OD600 of 0.8-1.0 is obtained. The 10L inoculum starter, 100L starter production, and 1000L production culture were grown in the fermenter using 2.8% molasses (wv), 0.5% urea (wv), and 0.05% yeast extract (wv) media at 35-40°C, an aeration rate of 1 vvm, a pO2 of at least 30%, a pH of 7.5, an agitation speed of 150-200 rpm for the starter inoculum and an incubation time of 6-8 hours for the starter production. Meanwhile, for the production culture, the agitation speed is 75-150 rpm, and the incubation time for protease harvest is 14-18 hours, or at the time of protease activity of 20-100 U / ml. The ratio of the volume of inoculant culture to the total culture volume between one stage and the next stage is 1:10. [French] par préparation d'une préculture, d'une culture de 100 mL, d'une culture 1 L dans un flacon agitateur à l'aide de milieux LB liquides incubés dans un agitateur incubateur pendant 3 à 4 heures à 35-40°C avec une vitesse d'agitation de 150 tr/min, jusqu'à ce qu'une OD600 de 0,8 à 1,0 soit obtenue. Un inoculum de départ de 10 L, une production de départ de 100 L et une culture de production de 1 000 L ont été cultivés dans la cuve de fermentation en utilisant 2,8 % de mélasse (m/v), 0,5 % d'urée (m/v) et 0,05 % de milieux d'extrait de levure (m/v) à 35-40°C, un taux d'aération de 1 vvm, un pO2 d'au moins 30 %, un pH de 7,5, une vitesse d'agitation de 150-200 tr/min pour l'inoculum de départ et un temps d'incubation de 6-8 heures pour la production de départ. Pendant ce temps, pour la culture de production, la vitesse d'agitation est de 75 à 150 tr/min et le temps d'incubation pour la récolte de protéase est de 14 à 18 heures ou au moment de l'activité de protéase de 20 à 100 U/ml. Le rapport du volume de culture d'inoculant au volume de culture total entre une étape et l'étape suivante est de 1:10.